Ciao, mercoledì ho l'esame di tecnologie ricombinanti ma non riesco a trovare il test delle proteine tronche(ptt)...qualcuno sa dirmi qualcosa per piacere? E poi nella parte della terapia genica, nella preparazione di modelli di animali transgenici qualcuno sa dirmi quale costrutto viene iniettato nella cavia? Aiutatemi please!!!
PTT: protein truncation test. é un saggio che viene eseguito per individuare se una mutazione sul DNA causa la formazione di un codone di stop con conseguente produzione di una proteina tronca. In pratica si fa avvenire la traduzione in vitro e si osserva poi la proteina che ne deriva mediante corsa su gel(se è o meno più piccola della wild type in termini di PM). Prova a dare un'occhiata a questa review (se hai la possibilità di scaricarla) e ancora qui
Citazione:Messaggio inserito da pallina
E poi nella parte della terapia genica, nella preparazione di modelli di animali transgenici qualcuno sa dirmi quale costrutto viene iniettato nella cavia?
Posta così questa domanda è un po' troppo generica, dovresti essere più precisa. Il costrutto è semplicemente un segmento di acido nucleico che contiene uno o più geni che si vogliono far esprimere in un animale da laboratorio. Se ad esempio hai un modello animale di Duchenne puoi provare ad inserire un costrutto contenente il gene della distrofina (ti ripeto, è solo un esempio) per vedere se e come cambia la patologia nell'animale. Quindi cosa ti serve sapere di preciso?
...we're just two lost souls swimming in a fishbawl...year after year...
Ti ringrazio....per il costrutto volevo sapere se può variare in base alla malattia oppure è una sequenza specifica standard per tutti i costrutti....grazie mille!!
le malattie genetiche sono diverse perchè dipendono da alterazioni diverse sul DNA quindi è normale che ogni costrutto sarà specifico per una determinata patologia. Se poi esistano (oltre ai geni malattia-specifici) anche delle sequenze conservate in ogni costrutto questo non te lo dire con certezza, ma penso che dipenda anche dal vettore con cui si fa il targeting. Magari per maggiori precisazioni aspettiamo qualcuno più esperto
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