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 Saggio di immunoprecipitazione della cromatina
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davide8118
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Prov.: Perugia
Città: San Giustino


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Inserito il - 25 giugno 2007 : 10:56:36  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di davide8118 Invia a davide8118 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Qualcuno saprebbe spiegarmi in maniera semplice e senza troppe specifiche il Saggio di immunoprecipitazione della cromatina!?

grazie mille,
Davide.

GFPina
Moderatore

GFPina

Città: Milano


8408 Messaggi

Inserito il - 25 giugno 2007 : 12:09:53  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di GFPina  Clicca per vedere l'indirizzo MSN di GFPina Invia a GFPina un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Ciao davide!
Prova a guardare se questi due post in cui ne avevamo parlato ti chiariscono le idee:
http://www.molecularlab.it/forum/topic.asp?TOPIC_ID=1818
http://www.molecularlab.it/forum/topic.asp?TOPIC_ID=1542

Altrimenti dicci se hai altri dubbi!

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davide8118
Nuovo Arrivato

Prov.: Perugia
Città: San Giustino


10 Messaggi

Inserito il - 25 giugno 2007 : 13:05:39  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di davide8118 Invia a davide8118 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Quindi immunoprecipitazione e microarray è la stessa cosa!?
La tecnica che si vede nell'animazione che c'è nel secondo post che mi hai consigliato è la stessa cosa dell'immunoprecipitazione!?
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GFPina
Moderatore

GFPina

Città: Milano


8408 Messaggi

Inserito il - 25 giugno 2007 : 13:57:44  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di GFPina  Clicca per vedere l'indirizzo MSN di GFPina Invia a GFPina un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Citazione:
Messaggio inserito da davide8118

Quindi immunoprecipitazione e microarray è la stessa cosa!?
La tecnica che si vede nell'animazione che c'è nel secondo post che mi hai consigliato è la stessa cosa dell'immunoprecipitazione!?



No no assolutamente! Sono due cose diverse!
Nel secondo post devi guardare la parte finale in cui si parla della immunoprecipitazione della cromatina!

Il fatto però è che dopo aver fatto l'immunoprecipitazione della cromatina puoi fare anche i microarray, questa tecnica si chiama "ChIP on chip" ed è l'unione delle due tecniche!

Parlando solo di Immunoprecipitazione della cromatina(ChIP) la tecnica è questa:
  • Si utilizza un anticorpo specifico per una proteina che si lega al DNA (ad es. un fattore di trascrizione che si lega al promotore).
  • Prima di tutto si utilizzano degli agenti crosslinkanti che mantengono la proteina legata al DNA
  • Poi si frammenta il DNA (ad es. mediante sonicazione)
  • Utilizzo l'anticorpo per fare una "immunoprecipitazione" e ottengo la proteina che mi interessa attaccata alla sequenza di DNA.
  • Dopo di che faccio revertire il crosslinking in modo che la proteina si stacchi dal DNA
  • A questo punto ho il frammento di DNA che posso studiare con altre techine: ad es. PCR o microarray





Mi spiace se ti ho fatto confusione, spero che adesso sia chiaro!

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davide8118
Nuovo Arrivato

Prov.: Perugia
Città: San Giustino


10 Messaggi

Inserito il - 25 giugno 2007 : 15:11:56  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di davide8118 Invia a davide8118 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Non ti preoccupare...

piuttosto grazie dell'aiuto...mi è stato utilissimo a fare un pò di chiarimenti.

Saluti,
Davide.
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