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Mollan
Nuovo Arrivato
Prov.: Milano
Città: Monza
9 Messaggi |
 Inserito il - 14 luglio 2007 : 14:31:09
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Lunedì ho l'esame di Laboratorio di biologia molecolare.
Ci sono varie tipologie di esercizi, ad esempio mappe di restrizione, temperature di melting, enzimi di restrizione ecc...
Una tipologia che non so risolvere è questa:
Qualcuno mi potrebbe spiegare le tecniche per risolvere questo tipo di esercizi?
Grazie mille in anticipo :)
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Schuldiner86
Utente Junior
Prov.: Viterbo
Città: Bologna
581 Messaggi |
Inserito il - 14 luglio 2007 : 15:11:57
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| Allora, proviamo a ragionare...Io so che 1 unità di assorbanza a 260nm per il DNA è pari a una concentrazione di 50ug/ml...Quindi in teoria la concentrazione nella cuvetta dovrebbe essere data dalla poporzione 50ug/ml : 1 = x ug/ml : 0,150, quindi x=7,5ug/ml...Contando che nella cuvetta la soluzione era diluita 1:60, per sapere la concentrazione nella madre moltiplichi 7,5ug/ml x 60 = 450ug/ml ...Io avrei ragionato così, ma non so se è giusto...Prego qualcuno di correggermi nel caso... |
 
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Mollan
Nuovo Arrivato
Prov.: Milano
Città: Monza
9 Messaggi |
Inserito il - 14 luglio 2007 : 15:57:59
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Citazione:
Messaggio inserito da Schuldiner86
Allora, proviamo a ragionare...Io so che 1 unità di assorbanza a 260nm per il DNA è pari a una concentrazione di 50ug/ml...Quindi in teoria la concentrazione nella cuvetta dovrebbe essere data dalla poporzione 50ug/ml : 1 = x ug/ml : 0,150, quindi x=7,5ug/ml...Contando che nella cuvetta la soluzione era diluita 1:60, per sapere la concentrazione nella madre moltiplichi 7,5ug/ml x 60 = 450ug/ml ...Io avrei ragionato così, ma non so se è giusto...Prego qualcuno di correggermi nel caso...
Grazie per la risposta :)
Allora fino ai 450ug/mL sono arrivato anche io. Però poi mi viene un dubbio... i 100uL di DNA che ho inserito in cuvetta...devo utilizzarli come dato oppure no?
Nella cuvetta la soluzione è sì diluita 1:60, però è anche diluita 100uL in 3mL.
Non capisco quindi se usare o no il dato del volume di DNA. :)
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Mollan
Nuovo Arrivato
Prov.: Milano
Città: Monza
9 Messaggi |
Inserito il - 14 luglio 2007 : 16:20:54
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Citazione:
Messaggio inserito da Schuldiner86
Allora, proviamo a ragionare...Io so che 1 unità di assorbanza a 260nm per il DNA è pari a una concentrazione di 50ug/ml...Quindi in teoria la concentrazione nella cuvetta dovrebbe essere data dalla poporzione 50ug/ml : 1 = x ug/ml : 0,150, quindi x=7,5ug/ml...Contando che nella cuvetta la soluzione era diluita 1:60, per sapere la concentrazione nella madre moltiplichi 7,5ug/ml x 60 = 450ug/ml ...Io avrei ragionato così, ma non so se è giusto...Prego qualcuno di correggermi nel caso...
Grazie per la risposta :)
Allora fino ai 450ug/mL sono arrivato anche io. Però poi mi viene un dubbio... i 100uL di DNA che ho inserito in cuvetta...devo utilizzarli come dato oppure no?
Nella cuvetta la soluzione è sì diluita 1:60, però è anche diluita 100uL in 3mL.
Non capisco quindi se usare o no il dato del volume di DNA. :)
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aitan3
Nuovo Arrivato
Prov.: Napoli
71 Messaggi |
Inserito il - 14 luglio 2007 : 20:17:23
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seondo me il dato del volume di DNA non va utilizzato. Riguardo alla diluizione devi considerare solo 1:60. 3ml rappresenta semplicemente la capienza della cuvetta, no il volume della soluzione madre.
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Schuldiner86
Utente Junior
Prov.: Viterbo
Città: Bologna
581 Messaggi |
Inserito il - 14 luglio 2007 : 20:21:23
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La cuvetta è grande 3ml, ma tu usi un volume solo di 100ul di cui 1/60 saranno di DNA e 59/60 di tampone o di acqua...Quindi non hai una ulteriore diluizione nella cuvetta, semplicemente quel dato non serve...  |
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Mollan
Nuovo Arrivato
Prov.: Milano
Città: Monza
9 Messaggi |
Inserito il - 14 luglio 2007 : 20:39:41
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Citazione:
Messaggio inserito da Schuldiner86
La cuvetta è grande 3ml, ma tu usi un volume solo di 100ul di cui 1/60 saranno di DNA e 59/60 di tampone o di acqua...Quindi non hai una ulteriore diluizione nella cuvetta, semplicemente quel dato non serve...
100ul in 3ml dovrebbero essere una diluizione di 1:30 (29 H2O e 1 DNA)
Quei 100ul sono stati diluiti, da una soluzione madre di 60 volte (59 H2O e 1 DNA)
Sicuri che non devo usarlo quel dato? (sto impazzendo, maledetti esami di luglio :P ) |
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Schuldiner86
Utente Junior
Prov.: Viterbo
Città: Bologna
581 Messaggi |
Inserito il - 14 luglio 2007 : 21:10:10
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Se la cuvetta è piena fino a 3ml devi considerare anche la diluizione che hai fatto nella cuvetta...a sto punto dovresti prima moltiplicare per 30 e poi per 60, cioè è come se hai fatto una diluizione 1:1800...In teoria dovrebbe essere così perché mi sembra che le diluizioni si moltiplichino...Ma mi sembra strano perché il risultato viene un pò tanto grande secondo me...Crisi!!!! |
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Mollan
Nuovo Arrivato
Prov.: Milano
Città: Monza
9 Messaggi |
Inserito il - 14 luglio 2007 : 21:53:41
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A chi lo dici... vengono 13.500 ug/mL ossia 13,5 mg/mL
Aspettiamo qualche esperto di diluizioni :P |
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Schuldiner86
Utente Junior
Prov.: Viterbo
Città: Bologna
581 Messaggi |
Inserito il - 15 luglio 2007 : 01:04:52
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Infatti è un pò troppo...O sei partita da un megapellettone che ti riempiva la eppendorf, o la vedo molto scura...  |
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AleXo
Moderatore
Prov.: Estero
Città: San Francisco, California
1550 Messaggi |
Inserito il - 15 luglio 2007 : 01:16:57
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13500 ug/mL corrispondono a 13,5 mg/L...
corrispondenti a 13,5 ug/ul che non mi pare poi tanto ed anzi penso sia la risposta giusta.(ssupponendo ke nella cuvetta si arrivi al volume finale di 3ml)
era solo un problema di unita' di misura 
in bocca al lupo |
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Mollan
Nuovo Arrivato
Prov.: Milano
Città: Monza
9 Messaggi |
Inserito il - 15 luglio 2007 : 13:52:21
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Citazione:
Messaggio inserito da AleXo
13500 ug/mL corrispondono a 13,5 mg/L...
Se ci sono 13500 ug in 1 mL.
ci saranno 13500000 ug in 1L...che sono 13500 mg/L.
o mi sbaglio?
Citazione:
corrispondenti a 13,5 ug/ul che non mi pare poi tanto ed anzi penso sia la risposta giusta.(ssupponendo ke nella cuvetta si arrivi al volume finale di 3ml)
era solo un problema di unita' di misura
in bocca al lupo
Ho capito che mi terrò l'unità in ug :P
grazie delle risposte :) |
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Schuldiner86
Utente Junior
Prov.: Viterbo
Città: Bologna
581 Messaggi |
Inserito il - 15 luglio 2007 : 17:07:37
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| Grazie Alexo, hai ragione...alla fine ci si perde in un bicchiere d'acqua... |
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GFPina
Moderatore
Città: Milano
8408 Messaggi |
Inserito il - 15 luglio 2007 : 18:47:57
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Citazione:
Messaggio inserito da Mollan
Citazione:
Messaggio inserito da AleXo
13500 ug/mL corrispondono a 13,5 mg/L...
Se ci sono 13500 ug in 1 mL.
ci saranno 13500000 ug in 1L...che sono 13500 mg/L.
o mi sbaglio?
Beh mi sa che ad Alexo è rimasta una "m" nella tastiera!
Voleva sicuramente scrivere: "13,5 mg/mL
Comunque di sicuro ne devi tener conto dei 100ul... altrimenti non avrebbe molto senso la domanda, avrebbero semplicemente detto "è stata letta una soluzione di DNA diluita 1:60"
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Mollan
Nuovo Arrivato
Prov.: Milano
Città: Monza
9 Messaggi |
Inserito il - 15 luglio 2007 : 19:14:58
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Citazione:
Messaggio inserito da GFPina
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Messaggio inserito da Mollan
Citazione:
Messaggio inserito da AleXo
13500 ug/mL corrispondono a 13,5 mg/L...
Se ci sono 13500 ug in 1 mL.
ci saranno 13500000 ug in 1L...che sono 13500 mg/L.
o mi sbaglio?
Beh mi sa che ad Alexo è rimasta una "m" nella tastiera!
Voleva sicuramente scrivere: "13,5 mg/mL
Comunque di sicuro ne devi tener conto dei 100ul... altrimenti non avrebbe molto senso la domanda, avrebbero semplicemente detto "è stata letta una soluzione di DNA diluita 1:60"
Perfetto...allora è semplicissimo un esercizio di questo tipo :P
prendo la concentrazione ignota (ottenuta dallo spettrofotometro) e la moltiplico per le due diluizioni. Figata :P
Grazie a tutti!!! :) |
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Mollan
Nuovo Arrivato
Prov.: Milano
Città: Monza
9 Messaggi |
Inserito il - 21 luglio 2007 : 21:05:53
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Grazie a tutti per le risposte... l'esame è andato bene:) 26! :D
Ciaooo |
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Discussione |
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LTA Biomolecolari, aiuto per un esercizio.
Didattica
