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comandante85
Nuovo Arrivato
12 Messaggi |
 Inserito il - 29 luglio 2007 : 17:35:32
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vorrei sapere come faccio a calcolare la concentrazione di un DNA RNA proteine dopo averle estratte...e quali sono i procedimenti per farlo..grazie ciao
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Schuldiner86
Utente Junior
Prov.: Viterbo
Città: Bologna
581 Messaggi |
Inserito il - 29 luglio 2007 : 17:48:55
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| Io lo farei con una lettura allo spettrofotometro...Le proteine assorbono a 280nm, la lunghezza d'onda a cui assorbono gli amminoacidi aromatici, e per stabilire la concentrazione ti devi costruire una retta di taratura facendo letture di soluzioni di una proteina a concentrazioni note e graficando concentrazione vs. assorbanza...Per il DNA e l'RNA la lettura si fa a 260nm, la lunghezza d'onda a cui assorbono le basi azotate, e 1 unità di assorbanza ottica equivale a 50ug/ul per il DNA e 40ug/ul per l'RNA... |
 
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comandante85
Nuovo Arrivato
12 Messaggi |
Inserito il - 29 luglio 2007 : 17:52:48
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| QUINDI cONCENTRAZIONE DNA =???? |
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RNA world
Utente Junior
370 Messaggi |
Inserito il - 29 luglio 2007 : 19:17:25
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quindi se hai assorbanza a 260nm= 2 ad esempio significa che hai una concentrazione 100 ug/ul...
w il nanodrop!!!! |
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Dorina
Nuovo Arrivato
Prov.: Monza
Città: Milano
30 Messaggi |
Inserito il - 30 luglio 2007 : 13:04:04
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| Salve, aggiungo pure la formula per calcolare la concentrazione degli acidi nucleici: A x 50 ug/ml x reciproco diluizione effettuata = concentrazione (ug/ml). Esempio se ho fatto una diluizione dell'acido nucleico 1 a 100 dopo lettura spettrofotometrica in provetta avrò 0.120 si avrà allora: 0.120 x 50 ug/ml x 100 = 600 ug/ml. |
Dorina Qehajaj |
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Schuldiner86
Utente Junior
Prov.: Viterbo
Città: Bologna
581 Messaggi |
Inserito il - 30 luglio 2007 : 15:05:22
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| Grande Dorina, me n'ero proprio dimenticato della diluizione, se no non la puoi riportare al tuo campione di partenza se nella cuvetta diluisci... |
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rossano
Nuovo Arrivato
15 Messaggi |
Inserito il - 31 luglio 2007 : 09:29:22
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Oggi, oltre ai metodi tradizionali spettrofotometrici, esistono in commercio delle macchinette a determinazione fluorometrica che io trovo eccezionali, nei tempi di esecuzione e nell'accuratezza dei risultati. Io utilizzo il qubit della Invitrogen e ti invio il link.
http://probes.invitrogen.com/products/quantitation/2.html |
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Cangrande
Utente Junior
Prov.: Verona
280 Messaggi |
Inserito il - 01 agosto 2007 : 18:36:07
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| Interessante Non lo conoscevo. |
Magnifico atque victoriosissimo Domino, Domino Kani Grandi de la Scala. |
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Discussione |
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concentrazione DNA
Didattica
