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Discussione

ilatre
Nuovo Arrivato

9 Messaggi

Inserito il - 06 settembre 2007 : 18:45:26

L' esempio , che non capisco molto bene � relativo alle beta globine...
dunque io costruisco una sonda per ricercare quale batterio ha inglobato il plasmide ricombinante contenente il c DNA codificante per le beta globine.
Conoscendo la seq di amminoacidi che compongono le beta globine risalgo dalla seq relativa dell mRNA e per trascrittasi inversa a quella del cDNA che user� come sonda...
E' cos� che costruisco la mia sonda per ricercare i geni delle beta globine???

se potete aiutarmi a capire meglio il tutto ....
grazie mille

ilaria

vinta
Nuovo Arrivato

Prov.: Piacenza
Citt�: Piacenza

81 Messaggi

Inserito il - 06 settembre 2007 : 18:57:52

Pi� che partire dalla sequenza amminoacidica io cercherei in banca dati il gene per la beta globina o direttamente il cDNA per la beta globina. Questo perch� essendo il codice genetico degenerato, rischieresti di costruire una sonda non troppo specifica, partendo dalla proteina

Young Scientist, yet another science blog

http://yscientist.blogspot.com

Schuldiner86
Utente Junior

Prov.: Viterbo
Citt�: Bologna

581 Messaggi

Inserito il - 06 settembre 2007 : 19:25:10

Data la degenerazione del codice genetico, se vuoi fare il procedimento che tu dici costruisci delle sonde Guessmer...Conviene prendere una sequenza ricca in amminoacidi codificati da un singolo codone e devi regolare le condizioni di stringenza quando fai l'ibridazione per evitare il rischio di avere falsi positivi...Altrimenti potresti usare degli anticorpi contro le beta-globine per saggiare se la proteina � stata espressa...
Se invece il gene della beta-globina � un gene reporter del tuo plasmide, e l'inserto riguarda un altro cDNA, la sequenza di quel gene ce la dovresti gi� avere e costruisci una sonda con quella sequenza...