| Autore |
Discussione |
|
|
Isabellaaaa
Nuovo Arrivato
Cittą: Salerno
13 Messaggi |
 Inserito il - 24 settembre 2007 : 18:38:30
|
 Ciao ragazzi!! La solita delucidazione..
Nella corsa elettroforetica su gel denaturante per RNA mi rimane l'etidio nei pozzetti e poi visualizzo una sola banda, MA PERCHE'? Sarą perchč devo aggiungere l'EtBr anche nell' RNA sample quando lo carico? S.O.S. vi prego se no la mia tesi nn va avanti!!!!! Grazie mille
|
|
|
|
|
GFPina
Moderatore
Cittą: Milano
8408 Messaggi |
|
|
Isabellaaaa
Nuovo Arrivato
Cittą: Salerno
13 Messaggi |
 Inserito il - 26 settembre 2007 : 16:31:58
|
 Ti ringrazio tanto, proverņ cosģ... meno male che mi salvate!!!! Grazie mille  |
 |
|
|
lą
Utente Junior
565 Messaggi |
Inserito il - 26 settembre 2007 : 17:33:14
|
ciao! non so' se per l'RNA č la stessa cosa, perchč non ci lavoro,
pero' quando faccio correre il DNA nel gel d'agarosio l'etidio lo metto nall'agarosio prima che solidifichi.
Perņ non so' se per l'RNA č la stessa cosa. |
|
|
|
GFPina
Moderatore
Cittą: Milano
8408 Messaggi |
Inserito il - 27 settembre 2007 : 14:52:01
|
Citazione:
Messaggio inserito da lą
ciao! non so' se per l'RNA č la stessa cosa, perchč non ci lavoro,
pero' quando faccio correre il DNA nel gel d'agarosio l'etidio lo metto nall'agarosio prima che solidifichi.
Perņ non so' se per l'RNA č la stessa cosa.
No non č proprio la stessa cosa, per il DNA va benissimo mettere l'etidio nel gel, mentre per l'RNA č meglio colorare dopo il gel o metterlo nel campione.
Se servisse qua trovate un protocollo!
|
|
|
|
Neuroscience
Utente
659 Messaggi |
Inserito il - 27 settembre 2007 : 15:48:17
|
Il fatto che vedi solo una banda nell'RNA... indica poche cose che puoi facilmente verificare con i tuoi occhi.
1) potrebbe essere la manda 28S, l'altra non la vedi perché gią vedi a malapena la 28S, e l'altra banda č meno intensa
2) l'RNA č degradato e vedi una sola banda un po' grossa e con i contorni un po' sfumati.
Con tutta probabilitą č la seconda, verifica con i tuoi occhi.
P.S.: per l'RNA č meglio non aggiungere l'editio nel gel denaturante poiché l'etidio+formaldeide dą una fluorescenza diffusa nel gel che confonde un po' l'analisi della qualitą/quantitą dell'RNA.
|
|
|
|
Neuroscience
Utente
659 Messaggi |
Inserito il - 27 settembre 2007 : 15:53:47
|
altra cosa che č capitata anche a me, č proprio la fuorescenza di etidio che rimane nei pozzetti.
Questa cosa la risolsi semplicemente lavando BENE i pettinini del gel, dato che spesso da me venivano usati anche per i gel a DNA e quindi si arricchivano di volta in volta di etidio ad ogni gel fatto.
Credo che l'etidio si fissava a dello sporco presente sul pettinino che poi si rilasciava sul gel durante la solidificazione, quindi rimaneva una fluorescenza nel pozzetto.
|
|
|
|
Isabellaaaa
Nuovo Arrivato
Cittą: Salerno
13 Messaggi |
Inserito il - 17 ottobre 2007 : 12:54:10
|
| Vi ringrazio tantissimo, ho risolto usando l'etidio solo nei sampler e lavando i pettini!! Grazie smack smack |
|
|
| |
Discussione |
|
Etidio nei pozzetti
Didattica e Relazioni
