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zelos1
Nuovo Arrivato

Occhio!
Prov.: Palermo
Città: Palermo


31 Messaggi

Inserito il - 10 ottobre 2007 : 18:26:52  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di zelos1  Clicca per vedere l'indirizzo MSN di zelos1 Invia a zelos1 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Salve a tutti
Mi potete dire perchè è importante eliminare ogni traccia di rna prima della pcr??
non dovrebbe dare fastidio alla polimerasi.
Al massimo qualche appaiamento aspecifico, ma non può essere incorporato o usato come primer.
Posso capire che dia fastidio nel sequenziamento, ma in un protocollo raccomandava di eliminarlo prima della pcr.

biotech
Utente Junior

Prov.: Padova
Città: Padova


170 Messaggi

Inserito il - 11 ottobre 2007 : 19:08:07  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di biotech  Clicca per vedere l'indirizzo MSN di biotech Invia a biotech un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Penso che sia perchè frammenti di RNA potrebbro appaiarsi al DNA stampo e quindi ostacolare l'avanzamento della polimerasi; infatti se l'enzima trova un frammento, si blocca. Oppure lo stesso RNA ibridato può diventare accidentalmente un primer: gli inneschi di RNA vengono utilizzati dalla natura per sintetizzare l'elica non senso. Ora queste sono solo mie opinioni, per cui prendile "con le molle"..

http://boincstats.com/signature/user_1342603.gif
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zelos1
Nuovo Arrivato

Occhio!

Prov.: Palermo
Città: Palermo


31 Messaggi

Inserito il - 12 ottobre 2007 : 12:30:00  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di zelos1  Clicca per vedere l'indirizzo MSN di zelos1 Invia a zelos1 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
SI infatti, penso sia proprio perchè l'appaiamento aspecifico di rna possa impedire alla polimerasi di replicare.
Che vengano usati come primer i filamenti di rna non penso, le polimerasi utilizzate non ne sono capaci.
Grazie per la risposta, ciao.
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