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lisetta
Nuovo Arrivato
Prov.: Milano
Città: mialno
91 Messaggi |
 Inserito il - 26 ottobre 2007 : 15:20:02
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sulla confezio della tripsina c'è scritto...
Description:
0.5% Trypsin, 5.3 mM EDTA•4Na
Mycoplasma screened. Porcine parvovirus and tested.
with 5.0 g/L Trypsin (1:250), 2.0 g/L of EDTA•4Na and 8.5 g/L of NaCl,
without Phenol Red
Dilution: Aseptically prepare 1X solution in balanced salt solution without Ca2+ and Mg2+.
Final concentration: 0.5 g of Trypsin (1:250) and 0.2 g EDTA•4Na/L.
Storage:
–5°C to –25°C
devo fare qualcosa? perchè io l'ho messa così com'è nel terreno contenente tessuto ma nn si è dissociato. Il protocollo dice di metterne lo 0.025% io ho fatto il calcolo essendo concentrata allo 0.5% su 1.5 ml di terreno ne ho messa 200 ul. Però magari nn dovevo metterla prendendola direttamente dalla sua confezione? in base a ciò ke c'è scritto in alto cosa devo fare a posso usare così o devo fare qualke cosa? grazie elisa
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darkene
Utente Junior
291 Messaggi |
Inserito il - 26 ottobre 2007 : 15:47:57
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cosa intendi per "terreno contenente il tessuto"? se c'è il siero non dissocerai mai il tuo tessuto perchè nel siero ci sono inibitori della tripsina. lo sapevi?
infatti quando si tripsinizzano le cellule piastrate devi prima togliere il terreno, lavare con PBS, toglierlo e poi aggiungere la tripsina. |
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Iside
Utente Attivo
Città: Napoli
1375 Messaggi |
Inserito il - 26 ottobre 2007 : 20:06:49
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Citazione:
Messaggio inserito da darkene
cosa intendi per "terreno contenente il tessuto"? se c'è il siero non dissocerai mai il tuo tessuto perchè nel siero ci sono inibitori della tripsina. lo sapevi?
infatti quando si tripsinizzano le cellule piastrate devi prima togliere il terreno, lavare con PBS, toglierlo e poi aggiungere la tripsina.
quoto |
...we're just two lost souls swimming in a fishbawl...year after year...
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lisetta
Nuovo Arrivato
Prov.: Milano
Città: mialno
91 Messaggi |
Inserito il - 29 ottobre 2007 : 08:37:58
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| no no ma nn c'è siero...il terreno nn contiene siero contiene sl tessuto da cui mediante azione tripsina dissocio e stacco cellule...per usare quella tripsina devo diluirla? il processo cn pbs lo effettuo per cellule ataccate ad una pistra qui invece ho tessuto da cui devo staccarle...però sulla etichetta della tripsina c'è scritto diluition ecc e volevo chiedrvi cosa devo fare |
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darkene
Utente Junior
291 Messaggi |
Inserito il - 29 ottobre 2007 : 12:17:46
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allora non so. non l'ho mai fatto.
io proverei o ad aumentare il tempo d'azione, o a metterne di più. |
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trispina etichetta nn capisco
Didattica e Relazioni
