fissare tessuto e altra domanda

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Autore

Discussione

lisetta
Nuovo Arrivato

Prov.: Milano
Citt�: mialno

91 Messaggi

Inserito il - 29 ottobre 2007 : 12:18:32

ho due domande da porvi tra loro differenti e nn collegate:

1) devo fissare un tessuto e guardarlo istologicamente via microscopio vi � un protocollo ke spiega cm fare?

2) devo mettere 1 mg/ml di tripsina ke ha concentrazione dello 0.025% in 1.5 ml di terreno: devo per caso fare 0.025%*1.5/1= 0.0375 quindi metto in 1.5 ml circa 37.5 ul di tripsina?

grazie a tutti

dobiri
Nuovo Arrivato

Prov.: Firenze
Citt�: Sesto Fiorentino

1 Messaggi

Inserito il - 04 dicembre 2007 : 11:56:02

Mi sembra che i parametri inseriti per la seconda domanda sono errati. Una soluzione allo 0.025% vuol dire che hai 0.25 mg/ml di tripsina nella tua soluzione stock. Ti ci vorrebbero 4 ml per avere 1 mg. E' probabile che la soluzione stock abbia una concentrazione di 25 mg/ml (cio� 0.025 g/ml). allora ti occorre:
CfxVf=CixVf

1x1.5=25x?
?=1x1.5/25=0.06 ml=60�l

GFPina
Moderatore

Citt�: Milano

8408 Messaggi

Inserito il - 04 dicembre 2007 : 17:20:25

dobiri innanzitutto benvenuto sul forum!!!

Volevo solo dirti che a questa domanda (che riasale a pi� di un mese fa) � gi� stato ampiamente riposto qui

Cri
Nuovo Arrivato

Citt�: Rovigo

68 Messaggi

Inserito il - 05 dicembre 2007 : 22:59:05

1) Fissazione la formalina tamponata al 10% il tempo dipende dallo spessore del campione , considera che il potere di penetrazione della formalina � 0,8 mm/h.
2) Disidratazione con una scala ascendente di alcool etilico fino all�assoluto.
I tessuti sono privati dell�acqua
3) Chiarificazione o diafanizzazione mediante xilolo o sostituti
4) Infiltrazione della paraffina
5) Inclusione (formazione blocchetto)
6) Taglio sezione di 2-3 micron (la fetta viene adesa al vetrino)
7) Colorazione con ematossilina- eosina
Ciao