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Discussione

ili
Nuovo Arrivato

Prov.: Pistoia
Citt�: borgo a buggiano

9 Messaggi

Inserito il - 30 novembre 2007 : 12:40:20

ciao a tutti ho bisogno di un aiuto su come disegnare primers

ho questa sequenza gtg agcagctgg gctggagagaga cgacagggct ggttgcccag ggtccccagg cctctgattc ctcactgatt gctcttag

mi chiede di disegnare una coppia di primers (20 pb) in grado di amplificare questo segmento intronico

help......grazie

ilaria lucarelli

chick80
Moderatore

Citt�: Edinburgh

11491 Messaggi

Inserito il - 30 novembre 2007 : 12:51:21

http://www.molecularlab.it/forum/topic.asp?TOPIC_ID=1655

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malaga
Nuovo Arrivato

15 Messaggi

Inserito il - 30 novembre 2007 : 12:59:51

Caratteristiche primers:
Lunghezza: 18-25 nt (20mer)
Composizione in basi: G/C = 50%
Temperatura di fusione (Tm): uguale per i primer
Tm = 2(A+T)�C + 4(C+G)�C
Due C o G al 3� dei primer (sarebbe meglio,il legame � pi� stabile;il 3'OH � importante perch� fornisce l'innesco per la polimerizzazione)
Assenza di self-complemetariet�
Assenza di complemetariet� tra i primer

Seguendo queste regole puoi costruire una buona coppia di primers.

ciao ciao

malax