salve..č la prima volta che facciamo la pcr real time e ci servirebbe alcune informazioni..spero ci possiate aiutare!! Il primo problema che abbiamo riscontrato č sulle diluizioni da effettuare per ottenere la concentrazione voluta del nostro campione. Es: dalla lettura allo spettrofotometro abbiamo 65 ng/ul e dobbiamo utilizzare una concentrazione di 50 ng/ul...che calcoli dobbiamo fare??? alla prossima per le altre domande... grazie!!!
se moltiplichi il VOLUME (microlitri) della soluzione usata per l'analisi UV per la C=65 ng/microlitri ottieni i ng di ac.nucleico che contiene la tua soluzione. Se precipiti e risospendi in un differente volume puoi cambiare a tuo piacere la CONCENTRAZIONE variando il volume. La C=gr/V(l);il V da usare sarā V(ul)=ngr/C,DOVE nel vostro caso la C=50 ng/micrlitro ciao ciao
certo,una normalissima diluizione...per ricavare il volume in cui risospendre moltiplichi V1(noto) per C1(noto) e lo dividi per C2(concentrazione che vuoi ottenere)...niente di diverso da quello che ho scritto sopra.