ciao a tutti, devo estrarre RNA da fettine di tessuto tagliate al criostato (10um di spessore). Potete consigliarmi quali accortezze avere per usare metodo Tryzol? inoltre, un processo di sonicazione può danneggiare l'RNA?
Dai, scherzavo. Avendo una quantità così piccola di campione forse ti converrebbe usare le colonnine per l'estrazione. Dopo aver tagliato il pezzo lo processi subito, vero? Non penso che la sonicazione danneggi l'RNA, ma devi fare in modo che stia a sonicare poco tempo e non so se la temperatura nel sonicatore possa essere mantenuta a +4°C ( se usi la metodica del trizol). Un metodo molto efficace per biopsie o piccole quantità di tessuto è uno strumento , ora non ricordo il nome ( se ti interessa te lo faccio sapere), che utilizza delle biglie che poni all'interno della tua eppendorf insieme al tuo pezzo, così da frantumarlo e disgregarlo adeguatamente. Noi ci siamo trovati benissimo, bisogna solo fare delle prove per decidere il tempo e il n° di biglie.