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Stefano
Nuovo Arrivato
1 Messaggi |
 Inserito il - 03 agosto 2005 : 16:09:15
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Per cortesia, c'è qualcuno che mi può spiegare, in parole semplici
come funziona un cromatografo ionico con soppressore e colonna ionica?
Se potete darmi anche qualche consiglio per trovare informazioni a riguardanti l'argomento ve ne sono profondamente grato.
Grazie
Stefano C.
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chick80
Moderatore
Città: Edinburgh
11491 Messaggi |
Inserito il - 04 agosto 2005 : 12:16:58
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Una colonna a scambio ionico e' una normale colonna per cromatografia (es. Sephadex o Sepharose o altre resine di questo tipo) che e' pero' derivatizzata con gruppi carichi positivamente o negativamente. Le resine con residui carichi + (resine cationiche) hanno ad es. gruppi ammonio NH4+, mentre quelle con residui - (resine anioniche) hanno solfato SO4-- o carbossile COO-.
Ora, se hai una miscela di sostanze cariche (+ e -) e neutre e la fai passare su una colonna derivatizzata, ad es., con COO-, tutte le sostanze neutre e quelle cariche negativamente passeranno nella colonna, mentre quelle cariche positivamente resteranno legate ai gruppi carichi - della resina.
A questo punto puoi aggiungere HCl o un qualsiasi altro acido che protona i gruppi COO- a gruppi COOH (naturalmente prima dovevi lavorare in ambiente neutro o basico) e le sostanze che si erano legate alla resina sono libere di eluire dalla colonna. In questo modo puoi separare sostanze cariche + da sostanze cariche - da sostanze neutre (queste ultime sono separabili con 2 passaggi, prima su resina + e poi su resina - o viceversa).
Ovviamente se vari le condizioni di forza ionica e pH gradualmente puoi eluire in tempi diversi differenti sostanze con la stessa carica.
Per quanto riguarda il soppressore, non ricordo esattamente come funzioni e a cosa serva... mi spiace, forse qualcun altro sapra' darti una mano!
Se hai bisogno di altri chiarimenti chiedi pure!
Ciao
nICO |
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