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maia84
Nuovo Arrivato




43 Messaggi
Inserito il - 13 gennaio 2008 : 17:48:04  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di maia84 Invia a maia84 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Ciao a tutti!Ho un quesito da porvi...Come rispondereste a questa domanda?
Avete isolato un clone di cDNA. L’avete sequenziato e trovato che è lungo 850 pb ed alla fine possiede una coda di poliA e segnale di poliadenilazione. Mediante Northern blot avete trovato che ci sono due bande una di 1.8 e l’altra di 2.4 Kb.
Quali spiegazioni potete dare al fatto che vengono riconosciute 2 bande? Fate delle ipotesi.
Sono sicura che riceverò tante risposte...

Aureus
Utente Junior

0613_da_Fil23

Prov.: Forlì-Cesena
Città: Gambettola


123 Messaggi
Inserito il - 13 gennaio 2008 : 19:18:59  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Aureus  Clicca per vedere l'indirizzo MSN di Aureus Invia a Aureus un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Secondo me il motivo può essere che il Nortern blot non è stato fatto in condizioni denaturanti e perciò si sono formate strutture secondarie.
Che ne dite?
www.tlbspazio.it

Tecnici di Laboratorio Biomedico
Lorenzo Nardi
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MirrorHole
Nuovo Arrivato

Il Professore



14 Messaggi
Inserito il - 13 gennaio 2008 : 19:51:25  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di MirrorHole Invia a MirrorHole un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Citazione:
Messaggio inserito da Aureus

Secondo me il motivo può essere che il Nortern blot non è stato fatto in condizioni denaturanti e perciò si sono formate strutture secondarie.
Che ne dite?

Premetto che non me ne intendo molto...non vorrei dire una grossa boiata...ma ammesso che l'elettroforesi non sia stata fatta in condizioni denaturanti, secondo me a parità di lunghezza una molecola di RNA in cui si siano formate strutture secondarie, poichè più compatta, migra più velocemente della corrispettiva molecola a struttura distesa...
...accendere una candela è gettare un'ombra...
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maia84
Nuovo Arrivato




43 Messaggi
Inserito il - 13 gennaio 2008 : 21:11:47  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di maia84 Invia a maia84 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Non credo,le condizioni devono essere denaturanti..Non potrebbe dipendere dal fatto che un gene può avere piu' siti di inizio per la trascrizione? Cosa ne pensate?
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MirrorHole
Nuovo Arrivato

Il Professore



14 Messaggi
Inserito il - 13 gennaio 2008 : 22:25:49  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di MirrorHole Invia a MirrorHole un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Citazione:
Messaggio inserito da maia84

Non credo,le condizioni devono essere denaturanti..Non potrebbe dipendere dal fatto che un gene può avere piu' siti di inizio per la trascrizione? Cosa ne pensate?

Credo sia possibile...è altrettanto probabile che l'RNA in esame per splicing alternativo o poliadenilazione alternativa possa dare mRNA di lunghezza diversa...
...accendere una candela è gettare un'ombra...
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Aureus
Utente Junior

0613_da_Fil23

Prov.: Forlì-Cesena
Città: Gambettola


123 Messaggi
Inserito il - 14 gennaio 2008 : 14:50:17  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Aureus  Clicca per vedere l'indirizzo MSN di Aureus Invia a Aureus un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Sono curioso,
qual'è il gene del tuo inserto?
Ma tu il Northern blot l'hai fatto in condizioni denaturanti?
Ne siete proprio sicuri che non dipende da isoforme diverse di RNA che danno strutture secondarie?
http://it.wikipedia.org/wiki/Northern_blot
www.tlbspazio.it

Tecnici di Laboratorio Biomedico
Lorenzo Nardi
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maia84
Nuovo Arrivato




43 Messaggi
Inserito il - 14 gennaio 2008 : 17:19:10  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di maia84 Invia a maia84 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Non conosco il gene. Ma sono sicura che le sequenze vengano fatte correre su un gel in condizioni denaturanti.
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