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Francesca D.
Nuovo Arrivato
Prov.: Campobasso
Città: Torella del Sannio
7 Messaggi |
 Inserito il - 30 gennaio 2008 : 18:45:12
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ciao manuela ! il metodo ELISA competitivo viene utilizzato per la determinazione della concentrazione dell'antigene che stimo dosando.
1. E' presete su una matrice solida un'Immunoglobulina, su questa viene versata una soluzione contenente l'antigene che vogliamo dosare e un secondo antigene macato con un enzima.
Una parte delle Ig lega l'Ag marcato ed una parte l'Ag non marcato.
2. ora viene immesso sempre sulla nostra Ig, che lega i due tipi di antigene( marcato e non marcato ) un substrato che è in grado di reagire con l'enzima presente sull'Ag marcato e darci una rezione colorimetrica che ci indica la concentrazione di enzima marcato.
3. ora ripetiamo il procedimento versando sull'Ig soltanto l'antigene marcato e quindi l'Ig ora impegna tutti i suoi legami solo con l'Ag marcato. Anche in questo caso aggiungiamo il substrato e calcoliamo la concentrazione di enzima marcato
4. E' possibile risalire alla concentrazione di antigene NON MARCATO facendo la differenza tra le due concentrazioni ottenute.
in pratica ciò che accade è che nel primo caso noi rileviamo una minore conc. di Ag marcato perchè molti siti sull'Ig sono occupati dall'Ag non marcato; mentre nel secondo caso la conc. dell'Ag marcato è superiore dato che occupa tutti i siti sull'Ig.
La differenza tra qst due valori ci da la Conc. dell'antiggene non marcato |
Francesca D. |
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Elisa competitivo
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