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gigios85
Nuovo Arrivato



31 Messaggi

Inserito il - 04 febbraio 2008 : 20:08:57  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di gigios85 Invia a gigios85 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
come risolvereste questo quesito?grazie a chi mi darà un aiuto

Vuoi studiare le cinetiche dell’enzima piruvato chinasi, che catalizza la reazione seguente:
fosfoenolpiruvato + ADP  ATP + piruvato
Quali tecniche potresti impiegare per misurare l’attività di questo enzima? E’ ipotizzabile l’impiego
di una tecnica cinetica continua che sfrutti l’assorbimento dell’ATP a 260 nm? Spiega il perché.

Marco De Giorgi
Nuovo Arrivato

Prov.: Lecce
Città: Monteroni di Lecce


55 Messaggi

Inserito il - 07 febbraio 2008 : 15:08:03  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Marco De Giorgi Invia a Marco De Giorgi un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
L'attività dell'enzima la puoi studiare accoppiando la reazione alla riduzione del piruvato a lattato per mezzo della lattico deidrogenasi.Si segue allo spettrofotometro il consumo di NADH + H+ nel tempo grazie alla diminuizione dell'assorbanza del NADH + H+ ,a lunghezza d'onda di 340nm, dovuta alla sua trasformazione in NAD+ che non assorbe a quella lunghezza d'onda.Riportando in grafico l'assorbanza in funzione del tempo ti ricavi la velocità matematicamente (la velocità è uguale alla pendenza della curva nel tratto iniziale). Si utilizza LDH in eccesso per far avvenire velocemente la reazione in modo da non influenzare la velocità della piruvato chinasi.In queste condizioni a ogni NAD+ che si forma corrisponde una molecola di ATP.
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