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asparagina20
Nuovo Arrivato
Prov.: Cuneo
Città: alba
28 Messaggi |
 Inserito il - 13 febbraio 2008 : 14:27:35
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Ciao!!
Qualcuno saprebbe spiegarmi la differenza tra immunoprecipitazione e pull-down??
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paoletta |
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Iside
Utente Attivo
Città: Napoli
1375 Messaggi |
Inserito il - 13 febbraio 2008 : 16:13:58
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detto in breve, il pull down ti consente di verificare se c'è interazione fisica tra due o più proteine, che può essere predetta anche da altre tecniche come la co-immunoprecipitazione, dove tu immunoprecipiti una poteina e usando poi un anticorpo diverso vedi se hai tirato giù anche qualcos'altro, nel qual caso puoi dire che c'è un complesso, un' interazione. l'immunoprecipitazione, invece, ti consente di isolare una singola proteina da un lisato totale. invece, la co-immunoprecipitazione può affaincare il pull down nella ricerca dei complessi proteici.
nota che un'immunoprecipitazione può "trasformarsi" in una co-immunoprecipitazione, avendo a disposizione gli anticorpi necessari.
alla fine, la co-immunoprecipitazione ed il pull down sono tecniche sinonime, ma nel pull down usi una proteine purificata e targata (bait) per legare e tirare giù una proteina partner(prey).
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...we're just two lost souls swimming in a fishbawl...year after year...
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asparagina20
Nuovo Arrivato
Prov.: Cuneo
Città: alba
28 Messaggi |
Inserito il - 13 febbraio 2008 : 21:17:34
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| Quindi, se ho capito bene, nel pull down non uso nessun anticorpo?? |
paoletta |
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Iside
Utente Attivo
Città: Napoli
1375 Messaggi |
Inserito il - 13 febbraio 2008 : 23:59:32
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beh direi di no, nel pull down la proteina bait (cioè l'esca) può avere un tag di His o GST. se può essere più chiaro guarda questa immagine, dove ti fa vedere proprio come avviene l'interazione fisica
Immagine:
44,57 KB
inoltre ho appena letto che "the difference between pull down and coIP is that coIP is the only one that allows you to look for a physiological in vivo interaction"
hope it helps
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...we're just two lost souls swimming in a fishbawl...year after year...
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asparagina20
Nuovo Arrivato
Prov.: Cuneo
Città: alba
28 Messaggi |
Inserito il - 17 febbraio 2008 : 01:32:41
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| Ok...perfetto! Ho capito. Grazie mille!! :) Anche se fa un po' arrabbiare ke in un esame chiedano delle cose ke non hanno spiegato!! Meno male ke ci siete voi!! |
paoletta |
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Iside
Utente Attivo
Città: Napoli
1375 Messaggi |
Inserito il - 17 febbraio 2008 : 12:57:36
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in bocca al lupo per l'esame  |
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