COME USARE LAMBDA 19 per RNA

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Pierdomenico
Nuovo Arrivato

Prov.: L'Aquila
Citt�: L'Aquila

11 Messaggi

Inserito il - 13 febbraio 2008 : 17:04:22

Salve a tutti, mi sapreste aiutare nell'uso del software LAMBDA 19 per calcolare la ratio e la concentrazione dell'RNA?
Io ho provato in ogni modo e non riesco a mettere il fattore di diluizione, inoltre ottengo valori bassissimi (dell'ordine A= 0.07)(spero sia per questo). Ho fatto per prova una lettura con un altro spettrofotometro diverso che sfrutta il software lambda 40 (quasi uguale)e li � tutto pi� semplice, soprattutto i valori delle assorbanze sono molto pi� alti (dell'ordine A = 0,6), peccato per� che io non posso usarlo.
Io uso la funzione wave program e faccio un autozero contro l'aria e un bianco con tris-EDTA poi risospendo il mio campione di RNA 1:1000 sempre in tris-EDTA e lo misuro con cuvette di quarzo. Ottengo un valore di Ass. 260 nm e uno a 280 nm. E' giusto quello che faccio?
In ogni caso l'ass. a 260 � pi� alta di quella a 280nm. Il mio problema principale � la ratio che mi viene intorno a 1,3.
Cosa devo fare? Ho congelato anche il pellet del passaggio con il cloroformio(non si sa mai). Quindi potrei riestrarlo nel caso il problema fosse proprio questo?
A proposito quante volte posso scongelare il mio RNA senza che questo si degradi troppo?
Grazie