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ottagono
Nuovo Arrivato

2 Messaggi

Inserito il - 19 febbraio 2008 : 14:58:12

Nn riesco a capacitarmi di quello che � successo oggi in laboratorio: ho amplificato e ristretto dei nuovi campioni per un polimorfismo con cui avevo gi� lavorato anni fa, e per conferma ho inserito un campione gi� genotipizzato anni fa...risultato:il campione vecchio da wt � diventato etero. A quel punto ho preso un bel p� di campioni vecchi, e i risultati sono spesso diversi...e sto parlando di campioni genotipizzati con la rflp e confermati in doppio anni fa...nn riesco a capire se c'� qualcosa che non va nel presente, o se ho sbagliato tutto nel passato, o se i campioni estrtti conservati a -20 possano aver subito qualche cambiamento!
primers ed enzima sono gli stessi, cosa pu� essere successo?
aiuto!!!

Gabriele
Utente

Prov.: Pisa
Citt�: Pisa

615 Messaggi

Inserito il - 19 febbraio 2008 : 19:05:47

Benvenuto nel club,ho dei campioni che,fatti 5 volte,hanno oscillato 5 volte tra eterozigote e omozigote mutato. Secondo me � l'enzima di restrizione che � poco efficiente quindi basta poco per far si che non digerisca completamente una banda.

"Chi rinuncia alla libert� per la sicurezza, non merita n� la libert� n� la sicurezza. E finir� col perdere entrambe."

ottagono
Nuovo Arrivato

2 Messaggi

Inserito il - 20 febbraio 2008 : 10:40:29

GRAZIE GABRIELE!Ank'io penso ke l'enzima di restrizione sia poco efficiente, ma la cosa strana � ke i campioni fatti oggi si confermano, ma sono diversi dai risultati passati che abbiamo gi� confermato. tu sai x caso dopo quanto tempo scadono gli enzimi di restrizione?