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Discussione

kumal
Nuovo Arrivato

Città: napoli

21 Messaggi

Inserito il - 11 marzo 2008 : 21:32:23

ciao a tutti!! il mio tutor ha fatto una pcr real time della sequenza di delta-lattoferrina, e ha trovato un posssibile polimorfismo..le basi coinvolte sono 6 (situate tra i due primers e esclusa la seq taq). mi ha chiesto di fare altre real time con sequenze di dna diverso per valutare se effettivamente c'è un polimorfismo..quindi devo usare 6 coppie di primers? ciascuna specifica per la possibile mutazione? inoltre mi ha chiesto di fare un protocollo a riguardo...come si fa???? grazie a tutti...spero che almeno in questo foeum mi risponda qualcuno

Topogigio77
Nuovo Arrivato

Città: Milano

37 Messaggi

Inserito il - 14 marzo 2008 : 12:37:20

...mi spieghi meglio?
- mutazioni puntiformi o inserzione/delezione?
- usi TaqMan o SYBR Green?
- cosa intendi per sequenze di DNA diverso?????

kumal
Nuovo Arrivato

Città: napoli

21 Messaggi

Inserito il - 14 marzo 2008 : 21:55:47

ciao!!! utilizzo SYBR-Green... ma in particolare usiamo sempre la stessa coppia di primers..dunque per individuare il polimorfismo occorre analizzare le temperature di denaturazione.. e verificare se ce ne sono 2 o 1sola anche nel DNA di altre specie..
poi parliamo di mutazioni puntiformi. ma nn capisco il funzionamento, cioè praticamente cosa bisogna fare? nessuna diluizione di DNA giusto?