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Autore Discussione  

vesania
Nuovo Arrivato

bravo
Città: rovigo-ferrara-rovigo


98 Messaggi
Inserito il - 18 marzo 2008 : 09:47:56  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di vesania Invia a vesania un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
quando le cellule raggiungono confluenza, per poter procedere agli step successivi, di conta cellulare oppure di diluizioni successive, si deve staccare il monostrato con trispinizzazione.
- inanzitutto si aspira il terreno di coltura che contiene siero e può inibire l'azione della trispina
- si effettua un lavaggio con PBS per impedire ch gli ioni Ca++ e Mg++ adeiscano alla perareti della fiasca
- si apira
- si aggiunge tripsina ed EDTA. che funzione ha l'EDTA in questo passaggio?

GRAZIE

domi84
Moderatore

Smile3D

Città: Glasgow


1724 Messaggi
Inserito il - 18 marzo 2008 : 10:24:14  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di domi84 Invia a domi84 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
EDTA è un chelante del Calcio e Magnesio, due molecole necessarie alle integrine di membrana per interagire con la piastra...quindi aiuta a staccare le cellule dalla piastra.
Il mio blog: http://domi84.blogspot.com/
Le foto che ho scattato...
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vesania
Nuovo Arrivato

bravo

Città: rovigo-ferrara-rovigo


98 Messaggi
Inserito il - 18 marzo 2008 : 10:26:12  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di vesania Invia a vesania un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
ma quello nn è compito del pbs?
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chick80
Moderatore

DNA

Città: Edinburgh


11491 Messaggi
Inserito il - 18 marzo 2008 : 12:14:45  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di chick80 Invia a chick80 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
No, il PBS è semplicemente un buffer, non chela il calcio.
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My photo portfolio (now on G+!)
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domi84
Moderatore

Smile3D

Città: Glasgow


1724 Messaggi
Inserito il - 18 marzo 2008 : 12:51:55  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di domi84 Invia a domi84 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Citazione:
Messaggio inserito da vesania

ma quello nn è compito del pbs?

Il pbs elimina tutto il terreno residuo, che contiene inibitori della tripsina...
Il mio blog: http://domi84.blogspot.com/
Le foto che ho scattato...
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vesania
Nuovo Arrivato

bravo

Città: rovigo-ferrara-rovigo


98 Messaggi
Inserito il - 18 marzo 2008 : 13:00:57  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di vesania Invia a vesania un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
grazie....
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Iside
Utente Attivo

Iside_paradise

Città: Napoli


1375 Messaggi
Inserito il - 18 marzo 2008 : 16:39:34  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Iside  Invia a Iside un messaggio Yahoo! Invia a Iside un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Citazione:
Messaggio inserito da domi84

Citazione:
Messaggio inserito da vesania

ma quello nn è compito del pbs?

Il pbs elimina tutto il terreno residuo, che contiene inibitori della tripsina...


esattissimo, in particolare l'FBS, inibitore della try.
...we're just two lost souls swimming in a fishbawl...year after year...
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