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vesania
Nuovo Arrivato

bravo
Città: rovigo-ferrara-rovigo


98 Messaggi

Inserito il - 18 marzo 2008 : 12:00:41  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di vesania Invia a vesania un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
per effettuare una curva di crescita microbica misuro allo spettrofotometro l'assobarza di una sospensione microbica a determinanti intervalli di tempo.

l'assorbanza viene espressa in termini di densità ottica (OD) ossia:
1OD= 8x10^8cell per ml, quindi per ogni assorbanza rilevata di moltiplica per 8x10^8cell per ml, il quale valore viene espresso in che termini? CFU?

in questo modo però si misurano sia i morti che i vivi.

quando invece da una piastra petri si effettua la conta vitale si suddivede in 4 quadranti la petri e si contatno il numero di colonie in essa contenuta. si effettua la media e poi si moltiplica il tutto per il numero di quadranti e per il numero della diluizione.
il risultato ottenuto è espresso in termini di cfu (unità formante colonie)?

per la curva di crescita utilizzo il log del risultato dell'assorbanza per 8x10^8cell per ml, oppure quello della conta vitale?

grazie per la risposta

nancy
Nuovo Arrivato



9 Messaggi

Inserito il - 06 aprile 2008 : 15:31:36  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di nancy Invia a nancy un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Teoricamente come mi hanno spiegato in lab sarebbe piu' corretto utilizzare i valori da conta vitale proprio perchè come da te giustamente affermato utilizzare i valori da assorbanza non permette di discriminare tra i batteri morti e vivi....però praticamente spesso la curva da conta virale presenta un errore molto maggiore rispetto a quella da assorbanza.
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Giuliano652
Moderatore

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Prov.: Brescia


6941 Messaggi

Inserito il - 10 aprile 2008 : 16:50:00  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Giuliano652 Invia a Giuliano652 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Dipende da che fase di crescita consideri. Se la conta la fai in fase logaritmica i morti sono trascurabili, se la fai in lag o in fase di morte è evidente che non li puoi più trascurare

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RafJuve
Nuovo Arrivato

1025_da_CIA

Città: Napoli


37 Messaggi

Inserito il - 05 luglio 2008 : 18:41:01  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di RafJuve Invia a RafJuve un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
ricapitolando = 1 O.D è uguale a 8x10^8 cell\mL ???in tutti i casi,e per qualsiasi tipo di batterio???
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Giuliano652
Moderatore

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Prov.: Brescia


6941 Messaggi

Inserito il - 06 luglio 2008 : 02:26:07  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Giuliano652 Invia a Giuliano652 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Mi sembrava di averti già risposto a questo, con questo link:
http://www.molecularlab.it/forum/topic.asp?TOPIC_ID=7106&SearchTerms=od,batteri

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RafJuve
Nuovo Arrivato

1025_da_CIA

Città: Napoli


37 Messaggi

Inserito il - 06 luglio 2008 : 23:52:25  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di RafJuve Invia a RafJuve un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
questo topic che mi hai postato è decisamente poco delucidante se accostato alla mia domanda
inoltre nell'altro topic,mi avevi sottolineato di non ricordare il "valore" di un unità di densità ottica...forse sarò io a non aver capito,ma anke nei link ke mi hai indicato tale valore non è espresso chiaramente...volevo tagliare la testa al toro con un ultimo quesito!!!pardòn...
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Giuliano652
Moderatore

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Prov.: Brescia


6941 Messaggi

Inserito il - 07 luglio 2008 : 00:08:20  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Giuliano652 Invia a Giuliano652 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Beh, nel topic in questione si dice:

Citazione:
No, ci possono essere colture microbiche che hanno uguale densità ottica ma che sono "concentrate"in modo diverso.
ci sono colonie batteriche che hanno la consistenza cremosa e perciò trattengono più luce di colonie che invece non hanno l'aspetto cremoso e che magari sono anche più concentrate.


Pensavo che fosse sufficiente come spiegazione. Nell'altro topic ho detto proprio di non ricordare se ci fosse una relazione fissa

Citazione:
esiste il modo di passare da OD a numero di cellule ma non mi ricordo come, e non ricordo nemmeno se è specifica per ogni batterio o se è generale, comunque, a spanne, se l'OD cresce, cresce il numero di batteri


Il valore non può essere espresso chiaramente, perché non c'è.

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