Conservazione sangue x estrazione RNA

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ale27
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1 Messaggi

Inserito il - 04 aprile 2008 : 11:58:18

Ciao a tutti, cercando in internet dei protocolli sono capitata su questo sito e mi sono iscritta, troppo bello!! Allora io ho sempre estratto RNA da tessuti mantenuti in RNA later ed utilizzando protocolli vari. Ora devo estrarre RNA da sangue, le domande sono:
1)passeranno ore prima che possa fare l'estrazione, quindi nel momento in cui si prelever� il sangue al macello come lo conservo e/o lo tratto?
2)potrei avere a disposizione tanti campioni quindi preferirei conservare direttamente i globuli bianchi a -80�C; aggiungo il trizol al pellet, trituro e congelo?
3)suggerimenti su protocolli? a disposizione ho il kit Invitrogen.
Aspetto vostre risposte. Grazie

max2612
Nuovo Arrivato

11 Messaggi

Inserito il - 04 aprile 2008 : 18:12:13

ciao volendo i campioni di sangue puoi prelevarlo e conservarlo con anticoagulante sempre in RNA Later mantenendolo in ghiaccio secco per il trasporto e poi conservarli in cella a -80 interi (senza centrifugarli o pellettarli prima)fino a quando ti servono. bisogna vedere poi il kit in tuo possesso che caratteristiche ha se per esempio ti permette di estrarre RNA da campioni trattati con RNA later

. la AMBION ad esempio fornisce un kit di estrazione di RNA direttamente dal sangue intero e da diverse indicazioni riguardo al trattamento del campione in base alle sue caratteristiche ad esempio se trattato con RNA later.