Sono uno studente di ctf,devo fare l'esame di biochimica applicata 2,ma ho alcuni dubbi sul sistema a doppio ibrido basato sul fattore di trascrizione GAL4. Qualcuno può darmi delle informazioni? sapete spiegarmi anche come si riconoscono i falsi positivi? Grazie
ciao! io ho fatto uno screening col two hybrid system e ho seguito questo protocollo che puoi scaricare da qui http://www.clontech.com/products/detail.asp?product_id=10631&tabno=3 ci sono sia le infoprmazioni teoriche all'inizio che proprio la parte pratica. i falsi positivi che crescono anche su terreno selettivo ma che in realtà non presentano i due costrutti che interagiscono possono essere individuati per esempio tramite pcr. cmq il ths rimane sempre un metodo di screening iniziale delle interazioni che ti permettere di restringere in un certo senso la cerchia dei potenziali interattori, poi in ogni caso servono altri esperimentio paralleli di verifica dei dati! spero di esserti stata utile ciao!