tet-doxiciclina --ma cosa è ?

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terreno85
Utente Junior

235 Messaggi

Inserito il - 25 maggio 2008 : 19:36:42

Qualcuno sa spiegaremi che cosa sia il sistema ricombinante tet-doxiciclina ? è una parte del programma , ma nn riesco a trovarla ne sul libro nel su web.

Una teoria può esserre provata da un esperimento. Ma nessun percorso guida dall'esperimento alla nascita di una teoria

paolo865
Utente Junior

Prov.: Como
Città: Olgiate Comasco

262 Messaggi

Inserito il - 25 maggio 2008 : 19:39:02

I sistemi Tet-Off e Tet-On rappresentano una strategia ottimale per l’espressione binaria di un
transgene. In questi sistemi, l’espressione del trnsgene di interesse è strettamente dipendente
dall’attività di un attivatore trascrizionale inducibile. La funzionalità di tale attivatore trascrizionale è reversibilmente regolata dall’esposizione dell’animale transgenico a concentrazioni variabili di tetraciclina o di alcuni suoi derivativi, quali la doxyciclina. Questi sistemi sono stati assemblati a partire dall’operone batterico Tet di E.coli.

paolo865
Utente Junior

Prov.: Como
Città: Olgiate Comasco

262 Messaggi

Inserito il - 25 maggio 2008 : 19:40:50

Nel sistema Tet-OFF, un promotore tessuto-specifico di interesse (P) controlla la sintesi di proteina di fusione (tTA) composta dal dominio di legame al DNA del repressore Tet di E. coli (derivante dall’operone batterico TetR) unito al dominio di attivazione della trascrizione della proteina VP16 del virus Herpes simplex. A sua volta, tTA regola l’espressione di un transgene
posto sotto il controllo trascrizionale di un Tetracycline-Response Element (TRE), localizzato nel promotore a monte del transgene stesso.
L’elemento TRE è composto da sette ripetizioni dell’operatore Tet (TetO) fuse ad un promotore minimo
derivato dal genoma del citomegalovirus (hCMV). In assenza di tetraciclina (o dell’analogo Doxyciclina) tTA si lega all’elemento TRE e attiva la trascrizione del transgene. In presenza di Tet o Dox, invece, tTA non è in grado di legare TRE e non si ha espressione del transgene.
Il sistema Tet-ON si differenzia dal tet-OFF unicamente per la presenza di 4 sostituzioni aminoacidiche nella proteina tTA. Per effetto di questi cambiamenti nella struttura primaria, la proteina corrispondente (rtTA) acquisisce un diverso pattern di legame al DNA che la rende capace di legare l’elemento TRE solamente in presenza di Tet o Dox.

Iside
Utente Attivo

Città: Napoli

1375 Messaggi

Inserito il - 25 maggio 2008 : 21:32:26

c'è già qualcosa sul forum a proposito dei sistemi di regolazione basati sul principio tet: vedi un po' se ti è di aiuto.
http://www.molecularlab.it/forum/topic.asp?TOPIC_ID=7463

...we're just two lost souls swimming in a fishbawl...year after year...