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Autore

Discussione

ki�
Nuovo Arrivato

Prov.: Padova
Citt�: padova

8 Messaggi

Inserito il - 25 novembre 2005 : 16:00:36

Ciao! Sto lavorando con rna estratto da campioni di femore di ratti trattati con metilprednisolone. Non riesco a trovare un buon gene housekeeping da usare come normalizzatore per real-time pcr. Ho provato con 18S, beta actina, GAPDH e beta2microglobulina , diciamo che il "meno peggio" � il 18S. Per "non buono" intendo che c'� una grande variabilit� tra i campioni.
Qualcuno ha qualche consiglio da darmi?
Grazie

chick80
Moderatore

Citt�: Edinburgh

11491 Messaggi

Inserito il - 25 novembre 2005 : 22:02:57

Non so in particolare gli effetti del metilprednisolone ma e' sempre un casino quando tratti con ormoni perche' sballano tantissimo la trascrizione. Trattando con estrogeno di solito si usa il 18S perche' di sicuro l'actina viene upregolata.
Hai provato a vedere cosa usano in letteratura?

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ki�
Nuovo Arrivato

Prov.: Padova
Citt�: padova

8 Messaggi

Inserito il - 26 novembre 2005 : 15:41:20

In letteratura fondamentalmente ho trovato gapdh e beta-actina per esperimenti simili