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Pabe
Nuovo Arrivato
Prov.: Roma
Cittā: Roma
15 Messaggi |
 Inserito il - 27 maggio 2008 : 16:24:59
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Puoi provare a fissare le cellule in ETOH assoluto (da 20 min in ghiaccio fino ad O.N.) e poi a marcarle con PBS/PI 50gamma/ul con l'aggiunta di RNase 200gamma/ul (incubazione al buio per 30 minuti RT).
Se dovessi perdere il segnale della GFP a causa della permeabilizzazione, allora puoi provare a fare il ciclo con L'Hoechst 3342 ma ti serve uno strumento in grado di leggere quello spettro.
Per l'apoptosi, oltre a considerarare la frazione sub G1 del ciclo, eistono diversi kit commerciali basati sull'incorporazione dell' annexin V rispetto al PI. L'importante č che, nel tuo caso, il fluorocromo coniugato all'annexin V sia compatibile con la GFP (tipo APC...) |
Se puzza č chimica
Se č verde e si muove č biologia
Se non funziona č fisica |
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FACS and GFP
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