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Discussione

Arlaune
Nuovo Arrivato

Prov.: Treviso
Citt�: Montebelluna

4 Messaggi

Inserito il - 01 giugno 2008 : 15:24:51

Ciao! Qualcuno sa dirmi come lavora una quenching solution composta da glicina e ammonio cloruro? Mi hanno detto che serve per smascherare antigeni che possono venir coperti durante il processo di fissazione, ma non capisco in che modo avviene lo "smascheramento"

betsim76
Nuovo Arrivato

7 Messaggi

Inserito il - 05 giugno 2008 : 10:32:57

La glicina e il cloruro di ammonio (ma anche il sodio boroidride) si legano ai gruppi aldeidici liberi del fissativo (di solito glutaraldeide, ma anche paraformaldeide, gliossale ecc) impedendo che si leghino aspecificamente all'anticorpo (funzione simile al siero normale). Inoltre impediscono ai gruppi aldeidici di legare ammine che possono generare autofluorescenza. Per quello che riguarda lo smascheramento, direi che viene usato come buffer abbinato al trattamento termico (in modo analogo alla glicina-Hcl pH 3,5), probabilmente (ma questo non lo si sa con certezza) sfruttando la sua capacit� di quenching con i gruppi liberi del fissativo e riducendo i crosslinking con la proteina.