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maidenmaria
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8 Messaggi |
Inserito il - 11 giugno 2008 : 12:24:56
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mi appresto a dare l'esame di TEPAN (come da titolo), ma ci sono alcune cose che la prof non ha spiegato, e se mi aiutate mi fate un favore:
1.quale sarà la resa massima di DNA di 10 microlitri di sangue umano? 2. quanti ml di ddH20 (acqua bidistillata) aggiungeresti a 2,922 g di NaCl per scioglierlo completamente? 3. hai ordinato un oligonucleotide di 20 basi (20 mer; 325 dalton/base). Ti arrivano 65,9 microgrammi liofilizzati e li risospendi in 1030 microlitri di acqua. Che concentrazione hanno?
grazie
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ale83t
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Città: Ferrara
21 Messaggi |
Inserito il - 11 giugno 2008 : 15:39:54
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ciao! alla prima domanda non saprei rispondere, ma alle altre forse riesco a dare una soluzione:
2 - la solubilità dell'NaCl in acqua dovrebbe essere 358 g/l (fonte internet). da qui si può ricavare che servirebbero minimo 8,348 ml di acqua. 3 - se non ho sbagliato i conti, PM dell'oligo è 6500 Da. 65,9 ug corrispondono a 0,0101 micromoli (ug/PM) e quindi se li sciogli con 1030 ul di H2O dovresti avere una concentrazione di 9.7 microMolare ( 0.0101*1000/1.03).
spero di non aver detto cavolate...magari aspetta che risponda anche qualcun'altro... |
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maidenmaria
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Prov.: Trieste
8 Messaggi |
Inserito il - 11 giugno 2008 : 16:31:02
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ho trovato anch'io 358 g/l per l'NaCl (293 K)...solo che dalla domanda non capisco se va bene anche una condizione di saturazione (che per NaCl mi sembra sia qualcosa come 5 M). per la 3 grazie, anche a me viene così...volevo una conferma (direi che se viene a entrambi sarà giusto...)
e se invece bisognasse preparare un gel di agarosio 10x10x0,6 cm al 2% in TBE 1x, EtBr 0,5 microgrammi/ml partendo dalle soluzioni TBE 1x ed EtBr 10 mg/ml...
Insomma innanzitutto mi manca una densità per l'agarosio! se no non so come procedere! |
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ale83t
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Prov.: Ferrara
Città: Ferrara
21 Messaggi |
Inserito il - 12 giugno 2008 : 11:22:55
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ma cosa devi trovare da questo quesito?
Citazione:
e se invece bisognasse preparare un gel di agarosio 10x10x0,6 cm al 2% in TBE 1x, EtBr 0,5 microgrammi/ml partendo dalle soluzioni TBE 1x ed EtBr 10 mg/ml...
se devi trovare quanto agarosio devi pesare da mettere nel TBE e quanto etidio bromuro prendere per arrivare alla concentrazione di 0,5 ug/ml allora questa dovrebbe essere la risposta:
il volume della soluzione dovrebbe essere 60 ml (volume parallelepipedo = 10*10*0.6 = 60 cm3 = 60 ml) e perciò essendo un 2% di agarosio devi pesarne 2*60/100 = 1.2 g da mettere nel TBE 1x. per l'etidio bromuro, devi diluirlo 20000 volte e quindi in 60 ml devi metterne 3 microlitri (60000 microlitri/20000 = 3 microlitri). |
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maidenmaria
Nuovo Arrivato
Prov.: Trieste
8 Messaggi |
Inserito il - 12 giugno 2008 : 18:03:28
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grazie mille!!! è che non ero sicura della corrispondenza cm3 e ml.......... ma altrimenti non avrei i dati per risolvere il problema... |
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