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rosita84
Nuovo Arrivato
11 Messaggi |
 Inserito il - 17 giugno 2008 : 05:03:57
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CIAO RAGAZZI STO PREPARANDO UN ESAME E LUNEDI AVRò LA PROVA DI LABORATORIO! HO BISOGNO DEL VOSTRO AIUTO....qlc1 di voi ha mai impostato il programma touch-down su una macchina d pcr?? praticamente il mio professore ha impostato tale programma:
- 94°C (5min);
- 94°C (0.3o min)
70°C (0.3o min)*
72°C (1.15 min) X 12 CICLI
- 94°C (0.3o min)
64°C (0.3o min)*
72°C (1.15 min) x 40 CICLI
-99°c (10MIN)
-70°c (0,10MIN)*
-70°c (0,10MIN)*
-4°c INFINITO
QLC1 DI VOI M POTREBBE FAR CAPIRE QLC?ANCHE QUEGLI ASTERISCHI!!! AIUTOOOOOOOOOOO
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Patrizio
Moderatore
Città: Barcellona
1915 Messaggi |
Inserito il - 17 giugno 2008 : 08:46:11
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| gli asterischi sono le T°di anniling,pero' e' strana questa touch down... |
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rosita84
Nuovo Arrivato
11 Messaggi |
Inserito il - 17 giugno 2008 : 17:17:15
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| è come se c fossero 2 pcr touch down...una per un genoma(A) e l'altra x il genoma B. Vi prego aiutatemi rischio la bocciatura |
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Patrizio
Moderatore
Città: Barcellona
1915 Messaggi |
Inserito il - 17 giugno 2008 : 21:53:18
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scusa ma che vuol dire una per il genoma A e l Altra per il genoma B ????, li e' sempre la stessa PCR,cambi solo l anniling...quei 12 cicli si riferiscono all anniling,estensione e elongazione... e poi fai l altra...si rosita84 ma tu hai preso male gli appunti pero',cioe' forse poi fa 20 cicli con anniling a 64°C e 20 a 70°C...cmq e' impostata male ..e poi onestamente e' proprio brutta,e' vero che io ne ho fatte di piu' brutte ...ma questa non scherza  |
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Patrizio
Moderatore
Città: Barcellona
1915 Messaggi |
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rosita84
Nuovo Arrivato
11 Messaggi |
Inserito il - 18 giugno 2008 : 21:24:53
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| ok ma l'altra a sto punto a ke m serva? solo x aumentare la quantita,? |
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GFPina
Moderatore
Città: Milano
8408 Messaggi |
Inserito il - 19 giugno 2008 : 00:46:47
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| Mah anche a me sembra un po' strana, comunque può essere che l'ultima parte sia per aumentare il prodotto dopo la touch down, comunque è stano anche che ci sia la denaturazione a 99°C e non ci sia l'extension ma 2 volte l'annealing (70°C)... |
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Pcr touch-down
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