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Autore

Discussione

marisa80
Nuovo Arrivato

Prov.: Roma
Città: roma

1 Messaggi

Inserito il - 18 giugno 2008 : 20:22:58

ciao a tutti....al mio lab stiamo cercando disperatamente di vedere la COX-2 tramite Western Blot, ma nn sempre ci riesce...forse l'errore è nell'estrazione della proteina....qualcuno saprebbe dirmi un qualcosa sul protocollo migliore da usare per la COX-2....

darkene
Utente Junior

291 Messaggi

Inserito il - 19 giugno 2008 : 20:06:36

se per cox intendi citocromo c ossidasi, allora ti posso dire che l'anticorpo commerciale monoclonale funziona benissimo. quello che ti posso suggerire (se non lo fai) è fare una lisi meccanica (tipo tramite potter)e subito dopo una centrifugata di 10 minuti a 800g. in questo modo butti giù i nuclei e nel surnatante avrai un arricchimento di mitocondri.
carica almeno 50 ug di estratto altrimenti potresti non vederla.