struttura primaria delle proteine....

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Autore

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dany molise
Nuovo Arrivato

31 Messaggi

Inserito il - 20 giugno 2008 : 20:32:59

ciao giovani mi servirebbe un aiuto per determinare la struttura primaria delle proteine:

- sequenza all'N terminale della proteina, degradazione di Edmna....cosa c'entra l'Hplc????

- frammentazione di peptidi, agenti proteolitici....

- risoluzione di una miscela peptidica su Hplc....

- ricostruzione del "puzzle" per determinare la struttura primaria

grazieeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeee...
ciaooooooooooooooooooooooooooooooooooo...

dany molise
Nuovo Arrivato

31 Messaggi

Inserito il - 21 giugno 2008 : 13:24:17

c'è qualcunoo che mi aiuti....

memole
Utente Junior

Prov.: Brindisi
Città: brindisi

577 Messaggi

Inserito il - 21 giugno 2008 : 16:00:08

Allora vediamo se riesco ad esserti un pò utile:
-per determinare la porzione N-terminale della proteina puoi ricorrere ad un metodo chimico, ad esempio utilizzando il reattivo di Sanger o quello di Edman. L'HPLC ti serve per capire quale aminoacido identifichi;
-per rendere più semplice il lavoro invece che usare la proteina integra la puoi indizialmente frammentare usando delle endopeptidasi, tipo tripsina, chimitripsina, etc;
-i peptidi che ottieni li puoi separare tramite HPLC, in modo da separarli in base alle caratteristiche chimico fisiche comuni. Questo ti andrà poi a facilitare nelle analisi successive;
-si parla di puzzle perchè i trattamenti con proteasi non li andrai a fare in condizioni drastiche ma blande, così da ottenere frammenti che tra loro possano essere sovrapponibili. Teeminate le analisi sui singoli peptidi sai in grado di ricostruire la sequenza primaria della tua proteina.
Spero di esserti stata utile