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chick80
Moderatore
Città: Edinburgh
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 Inserito il - 02 luglio 2008 : 16:23:55
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Non ho sotto mano il protocollo, quindi te lo scrivo a memoria.
La preparo in PBS pH 7.2. Siccome la PF si scioglie più facilmente in ambiente basico, se la prepari direttamente in PBS ci metti una vita, quindi di solito la si prepara in acqua e poi si aggiunge il PBS concentrato.
LAVORARE ASSOLUTAMENTE SOTTO CAPPA
1) prendi la PF in polvere e ne pesi 40g per l di soluzione finale.
2) la sciogli in 2/3 del volume finale di H2O, scaldando a 60 gradi e aggiungendo un pochino di NaOH per basificare il tutto (un paio di ml di NaOH 1M per un litro dovrebbero bastare). Attenzione a non andare oltre i 65 gradi o la PF comincerà ad degradarsi. La soluzione si dovrebbe chiarificare quando aggiungi NaOH.
(come per qualsiasi soluzione, ovviamente conviene mettere un po' meno di 2/3 di volume e portare a volume una volta che hai sciolto la PF)
3) aggiungi 1/3 del volume finale di PBS 3x
4) correggi il pH (se necessario, di solito è a posto)
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Preparazione Paraformaldeide 4%
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