salve ragazzi! sto studiando molecolare... ma il walking on the chromosome proprio non l'ho capito!!! sia quello classico che quello modificato: potete aiutarmi??? grazie, baci e tanti auguri di buone feste
Innanzitutto devi partire da una genoteca genomica costruita mediante tagli casuali (es doppia digestione parziale) perchč sicuramente genererai dei frammenti di restrizione parzialmente sovrapponibili. Ora isolando un clone dalla genoteca ti costruisci una sonda marcata corrispondente all'estremitā del tuo frammento. Dopodichč utilizzi questa sonda per cercare il frammento,che nel genoma di partenza era adiacente al 1. La tua sonda,infatti, si anniderā sul frammento parzialmente sovrapponibile al 1.Ottenuto il 2 pezzo ti costruisci sempre una sonda dell'estremitā e ripeti i passaggi. Questa č la metodica classica..quella modificata non la conosco. Ti consiglio il testo dna ricombinante.