Ciao a tutti, sono una biologa dell'Università di Pisa e devo iniziare a studiare per la prima volta il calcio intracellulare nei monociti prima e dopo stimolazione. Non ho a disposizione lo spettrofluorimetro e pensavo di utilizzare la sonda fluo-3/AM in citofluorimetria, qualcuno di voi ha esperienza in questo campo? Avete un protocollo da suggerirmi? L'acido pluronico è indispensabile?
Probabilmente potresti fare a meno dell'acido pluronico se hai cellule in sospensione. E' invece assolutamente indispensabile se usi tessuti, per aumentare la permeabilità delle cellule. Gli esteri AM sono comunque lipofilici, quindi in teoria dovresti riuscire facilmente (la cosa più facile è provare senza pluronico e se hai solo poche cellule marcate allora mettilo!)