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imy
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13 Messaggi

Inserito il - 22 settembre 2008 : 10:09:58  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di imy Invia a imy un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
come faccio per sapere esattamente la quantità di m-rna una volta fatta tutta la procedura prevista dal northern blotting?la taglia?e perchè uso questa tecnica per vedere se un gene è acceso o spento?

Schuldiner86
Utente Junior

Biotech

Prov.: Viterbo
Città: Bologna


581 Messaggi

Inserito il - 22 settembre 2008 : 11:03:57  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Schuldiner86  Clicca per vedere l'indirizzo MSN di Schuldiner86  Invia a Schuldiner86 un messaggio Yahoo! Invia a Schuldiner86 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
In linea di principio, non penso che ci sia un modo per stabilire una quantità esatta di mRNA col Northern Blot...Potresti avere una stima della trascrizione di un gene mettendo a confronto la radioattività di una sonda per un house-keeping gene e il gene di tuo interesse...Penso ci siano anche dei software che però fanno una analisi quantitativa così come esistono per i gel...La taglia del tuo mRNA penso che riesci a saperla facendo un confronto con il ladder che avrai dovuto far correre su gel e segnato sulla membrana dopo il trasferimento...Per vedere se un gene è acceso o spento puoi usare diverse probes per i diversi geni di tuo interesse...Potresti anche fare una RT-PCR o una Real Time...



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