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zi86
Nuovo Arrivato
3 Messaggi |
 Inserito il - 25 settembre 2008 : 17:29:45
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ciao a tutti, c'è qualcuno che potrebbe aiutarmi a svolgere i seguenti
esercizi. io nn so proprio cm fare... devo riconsegnarli entro il 30 settembre. Ve ne sarei veramente grata.
1) Il dosaggio di un estratto cellulare per l’enzima fosfatasi alcalina ha dato come risultato #916;A/#916;t = 0,1. Considerato che il #916;#949;=18 mM-1 cm-1 a 410 nm nelle condizioni di saggio e che ho utilizzato 15 µl di estratto in un volume finale di 0,5 ml, calcolare le Unità enzimatiche per millilitro contenute nell’estratto.
2) Una curva di taratura per la determinazione colorimetrica della concentrazione di proteine con il metodo di Bradford ha dato i seguenti risultati:
BSA mg/ml Assorbanza a 595 nm
0,001 0,022
0,002 0,050
0,003 0,075
0,004 0,100
0,005 0,125
0,006 0,150
0,007 0,172
Riportare i dati su un grafico utilizzando carta millimetrata
Un campione a concentrazione ignota (X) è stato diluito 50 volte per essere saggiato con lo stesso metodo e le assorbanze ottenute per le prove in doppio sono state le seguenti: 0,012 e 0,014
Calcolare la concentrazione di proteine nel campione (X).
3) Ho preparato un estratto cellulare che ritengo contenere circa 10 mg/ml di proteine, devo comunque dosare il contenuto esatto. Considerando che userò il metodo Bradford quante volte devo diluire il mio campione per poter utilizzare la curva di taratura descritta nell’esercizio 2? .
4) Una proteina monomerica contenente il gruppo eme ed in grado di legare reversibilmente l’ossigeno, mostra una P50 di 15 Torr. A quale pressione parziale di ossigeno si può considerare satura al 99%?
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lachimica
Utente Junior
Prov.: Pisa
346 Messaggi |
 Inserito il - 27 settembre 2008 : 16:59:17
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il 3)l 'ho già risolto altrove; ora facco il 5); per gli altri, non sono sicura, perchè non sono un'esperta di questi argomenti..
...In linea generale è una proteina che lega un ligando, ovvero l'ossigeno, per poterlo trasferire
e rilasciare ai tessuti;
Qualora volessimo determinare il rapporto che c'è tra i siti di legame effettivamente
utilizzati e il numero totale di siti di legame possiamo assegnare tale valore alla lettera
theta= [L] / ([L]+Kd)
Dove L raprresenta il ligando, cioè l'ossigeno, e Kd è la costante di dissociazione del complesso proteina-ligando;
Considerando che [L] sarà proporzionale alla Pressione e che la P50 della mioglobina è
la pressione parziale nella quale la molecola è satura al 50% di ossigeno possiamo
operare come segue:
theta = 0.50 = 15torr / (15torr + K’d) = >
0.50*15 + 0.50*K’d = 15
K’d = 15*(1 – 0.50) / 0.50 = 15
theta = 0.99 = X / (X + 15)
0.99*X + 0.99*15 = X
X*(0.99 – 1) = -0.99*15
X = 1485torr |
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lachimica
Utente Junior
Prov.: Pisa
346 Messaggi |
Inserito il - 27 settembre 2008 : 17:01:00
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| cioè ho fatto il 4)... |
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